Экспертный контент

Мазок на вирус папилломы

мазок на вирус папилломы

В свете новых знаний о ведущей роли папилломавирусов в развитии злокачественных процессов эпителия и кожи, существенное клиническое значение приобрел мазок. Это наиболее доступный метод диагностики папилломавирусной патологии на слизистых оболочках. С его помощью удается проводить исследования на угрозу рака в режиме скрининга. То есть быстро обследовать большое число людей, при этом стоимость диагностики достаточно низка.

Мазок предоставляет диагностический материал для всех способов выявления вирусов папилломы: ДАЙДЖИН, ПЦР, цитологического и гистологического исследования, типирования. И для оценки концентрации вирусов в очаге поражения – во рту, на шейке матки, в анусе, в уретре и другой локализации.

Но есть немало деталей, от соблюдения которых зависит достоверность результатов исследований.

Содержание статьи

  • Мазок на вирус папилломы: общая характеристика метода сбора материала
  • Показания к обследованию на вирус папилломы
  • Мазок на вирус папилломы: возможности лабораторной диагностики
  • Методика взятия образца на вирус папилломы
  • Исследование мазка на вирус папилломы
  • Типирование на вирус папилломы
  •  ПЦР на вирус папилломы
  •  Digene-тест на вирус папилломы
  •  Уточнение вирусной нагрузки
  •  Куда обратиться для сдачи мазка на вирус папилломы
  • Расшифровка и интерпретация мазка на вирус папилломы

Мазок на вирус папилломы: общая характеристика метода сбора материала

По своей сути, мазок – не что иное, как способ получения диагностического материала для лабораторной диагностики.

В нашем случае, искомый предмет – вирусы папилломы человека (ВПЧ).

Возбудители передаются контактным способом. Мишенями для них являются клетки эпителия и эпидермиса. Проникнув в клетку, ВПЧ интегрируют свой геном в обменные процессы мишени, из-за чего та начинает делиться с образованием неполноценных дочерних клеток.

На коже, где хорошо выражен наружный роговой слой эпидермиса, такие образования приобретают вид типичных бородавок с плотной и жесткой поверхностью. строение вируса папилломы На эпителии, лишенном рогового слоя, внешний вид вызванных ВПЧ образований иной, поэтому они называются кондиломами. Это могут быть остроконечные наросты, плоские папуловидные бородавки или просто пятна. Особенность кондилом в том, что их субстратом служит эпителий. Его клетки связаны между собой не так плотно, они достаточно легко отслаиваются.

Значит, для диагностики папилломавирусных процессов, здесь можно использовать метод мазка. Когда с помощью тампона или щеточки собирают материал с кондиломы и исследуют в условиях лаборатории.

Показания к обследованию на вирус папилломы

Распространенность ВПЧ среди людей не поддается оценке. Проблема в том, что среди более сотни типов возбудителей есть опасные штаммы папилломавирусов. Они провоцируют развитие злокачественных процессов со стороны пораженного эпителия/эпидермиса. Справиться с образованием гораздо легче тогда, когда процесс еще доброкачественный. Поэтому мазок на папиллому назначается по факту появления кондиломы.

Симптомы при этом бывают разные, все зависит от локализации процесса и развитости образования:

    • появление любого новообразования на слизистой оболочке рта, заметное визуально;
    • ощущение инородного тела в горле при глотании, дыхании;
    • дискомфорт и ощущение инородного тела в области прямой кишки, ануса;
    • дискомфорт, болезненность внизу живота у женщин;
    • кровомазанье в периоде между месячными или после полового акта у женщин;
    • развитие новообразования в области наружного отверстия мочеиспускательного канала у женщин и мужчин.

 симптомы вируса папилломы Проблема в том, что начальные стадии кондиломатоза протекают практически бессимптомно. Кондиломы обнаруживаются при осмотрах по любому другому поводу. Например – при профилактических гинекологических осмотрах на предмет ранней диагностики патологии шейки матки. Или в результате обследования в женской консультации при беременности. Основная цель – установить тип вызвавшего кондилому возбудителя (провести типирование), чтоб разработать оптимальную тактику лечения для пациента.  Если это будут ВПЧ высокого канцерогенного риска с генотипами 6, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, то однозначно потребуется удаление новообразования.

В противном случае – можно попробовать другие, консервативные методы борьбы с папилломавирусной инфекцией. Серьезное значение имеет обследование папиллом на предмет типа вызвавшего их ВПЧ тем женщинам и мужчинам, которые намерены сделать прививку от вирусов. В таких случаях мазок делают для типирования возбудителей и установления риска их онкогенности. От результатов зависит необходимость и срок проведения вакцинации.

Мазок на вирус папилломы: возможности лабораторной диагностики

Мазок с кондиломы, по сути – микробиопсия тканей, содержащая в себе зараженные папилломавирусами клетки эпителия.

Чтоб установить тип возбудителя и массивность вирусной обсемененности, применяются такие методы диагностики биологического материала:

    • цитологическое исследование на стекле с окраской по Папаниколау (ПАП-тест);
    • жидкостная цитология, когда образец помещается не на стекло, а в жидкую среду;
    • гистология;
    • молекулярно-биологические или генетические методики – ПЦР, DIGENE (дайджин-тест).

 забор мазка на вирус папилломы С точки зрения клинической целесообразности и диагностической ценности, предпочтение отдают молекулярно-генетическим методикам. По крайней мере – на старте диагностики.

Если их данные покажут наличие в кондиломе опасных по развитию рака генотипов ВПЧ, то далее проводится цитология и гистология, чтоб установить стадию процесса. При доброкачественности образования, удаление проводится по одному алгоритму. Если же в мазке будут найдены признаки озлокачествления, то и вмешательства потребуются соответствующие, более обширные и серьезные.

Методика взятия образца на вирус папилломы

Естественно, разная локализация кондилом потребует разных техник взятия мазка:

    • с шейки матки мазок берется с использованием влагалищных зеркал;
    • при кондиломах во рту иногда устанавливается роторасширитель;
    • мазок с кондилом в анусе берется с помощью колоноскопа.

Для взятия мазка применяется специальная щеточка с мягкой полимерной щетиной, поэтому процедура проходит практически безболезненно.

Некоторый дискомфорт могут причинять подготовительные манипуляции – установка колоноскопа или зеркал. Обращение к профессиональному и опытному дерматовенерологу позволяет свести дискомфорт к минимуму.

Забор мазка – очень ответственный процесс. Так как от того, попадут ли в образец пораженные папилломавирусами клетки, зависит и результат последующих исследований.

Оптимальный алгоритм предполагает взятие материала из нескольких мест:

    • по периферии кондиломы;
    • с ее центра;
    • с границы между образованием и визуально нормальным эпителием;
    • с участка здорового эпителия поблизости от кондиломы.

Для каждого места необходима своя щеточка, которые затем маркируются и передаются в пробирке с транспортной средой в лабораторию.
 эппендорф с мазком на вирус папилломы При сочетании ВПЧ и других заболеваний, передающихся половым путем (гонорея, трихомонады и так далее), в процессе сбора мазка с воспаленных поверхностей может возникать боль. Впрочем, врачи нередко сначала вылечивают ЗППП и только после этого начинают выяснять ситуацию с папилломами. Иногда пациенты обращаются со старыми процессами, когда уже сформированы крупные генитальные кондиломы Бушке-Левенштейна.

В таких случаях мазок берется с нескольких мест новообразования. Обязательно – поблизости от его основания и с пространства между криптами. Из-за таких особенностей, взятие мазка при кондиломе Бушке-Левенштейна может протекать с болью. К счастью – не всегда.

Достаточно часто приходится сталкиваться с проблемой ВПЧ у ВИЧ-инфицированных пациентов. Иммунитет у людей слабеет настолько, что кондиломы теряют характерные внешние признаки, обсеменяются грибками. В таких условиях, собрать качественный и диагностически ценный мазок при ВИЧ способен только квалифицированный специалист.

Исследование мазка на вирус папилломы

Рассмотрим наиболее востребованные молекулярно-биологические методы.

При правильном заборе материала для мазка, точность таких исследований близится к 100%. Методы позволяют установить два момента:

    • генотип возбудителя или нескольких (микст – не редкость при ВИЧ, кондиломах Бушке-Левенштейна);
    • вирусную нагрузку в очаге – актуально для обследования при беременности, так как концентрация вирусов влияет на принятие решения о дальнейшей лечебной тактике.

При этом молекулярно-биологические тесты обходятся дешевле, чем цитологическое исследование ПАП-мазка или гистология. Поэтому рекомендуется сначала типировать возбудителей. И при выявлении онкогенных типов ВПЧ, продолжить углубленное изучение процесса.

Типирование на вирус папилломы

Анализ мазка на вирус папилломы с типированием следует считать основным. онкогенные ВПЧ

Так как он позволяет ответить на самый важный вопрос – есть ли риск перерождения кондиломы в раковую опухоль.

Среди более сотни типов ВПЧ, многолетними наблюдениями подтверждена высокая онкогенная опасность для 12 (по другим источникам – 14) генотипов папилломавирусов.

 ПЦР на вирус папилломы

Наиболее распространенный и изученный способ типирования возбудителей кондилом.

Основан на выявлении в мазке уникальных для каждого генотипа ВПЧ последовательностей ДНК (собственно – по этим же маркерам их и типировали ученые).

ПЦР широко распространен, тест-системы выпускаются многими производителями. Для удобства, производятся готовые наборы для идентификации в мазке 12 или 14 онкогенных типов ВПЧ. Благодаря этому удается сократить время ожидания результатов до нескольких часов.

Однако ПЦР обладает рядом особенностей, затрудняющих скрининговое применение технологии. Главным образом – из-за высокой стоимости оборудования и реактивов.

 Digene-тест на вирус папилломы

Альтернатива ПЦР – ДАЙДЖИН тест.

Методика также рассчитана на выявление генетических особенностей типа ВПЧ, но обладает рядом преимуществ и особенностей:

    • тест стандартизованный, его результаты легко интерпретировать;
    • исключается возможность контаминации, ложноположительных срабатываний;
    • подготовка образцов мазка легче и проще, чем при ПЦР;
    • метод был одобрен для скрининга FDA и подобными организациями Европы.

По мере совершенствования методики, количество типируемых возбудителей вырастает. Сейчас есть комплекты для детекции в мазке сразу 21 типа папилломавирусов.

 Уточнение вирусной нагрузки

Возможность получения количественной оценки, концентрации ВПЧ в материале мазка, предоставляют оба метода – вариант ПЦР в реальном времени и ДАЙДЖИН. мазок на папиллому человека с концентрацией Однако для анализа мазка на концентрацию возбудителей папилломы, некоторые врачи рекомендуют применять именно ДАЙДЖИН тест. Информация имеет важное клиническое значение. Так как позволяет оценить активность репликации ВПЧ, отклик на лечение и вероятность рецидива папилломы.

Насколько точны результаты?

По результатам клинических испытаний, точность молекулярно-биологических анализов достигает 98-100%. Это если брать специфичность – способность тест системы идентифицировать в образце генотип того или иного ВПЧ, если они там есть. Но когда дело касается чувствительности, то здесь все не так однозначно, диапазон значений составляет 65-98%. Другими словами, вероятность получить ложноположительный ответ равняется практически нулю.

А вот шанс ложноотрицательного результата может достигать 35%, что не так уж и мало. Объясняется все просто. Главное, от чего зависит достоверность результатов анализов, это чтоб зараженные ВПЧ клетки попали в мазок. Если их там не окажется, то лаборатория даст отрицательный результат по типированию и, естественно – по концентрации. Такие случаи, хоть редко, но бывают.

Поэтому кроме тщательного соблюдения процедуры взятия мазка, необходимо выполнение еще ряда условий:

    • Положительным, результат мазка становится спустя несколько недель от момента заражения. Если взять образец раньше – он с большой вероятностью будет отрицательным.
    • Прием противовирусных препаратов может привести к ложноотрицательным результатам, особенно при локализации кондиломы во рту. В таких случаях мазок нужно сдавать спустя 10-14 дней от последнего применения лекарства. Антибиотики на ВПЧ не действуют, анализ можно брать хоть через час после приема антибактериальных препаратов.
    • В случае сомнительного результата, мазок нужно повторить через несколько дней с использованием другого лабораторного метода исследования.

Это то – что касается медицинской части диагностики ВПЧ в кондиломах.

 Куда обратиться для сдачи мазка на вирус папилломы

Видно, что для максимальной уверенности в результатах, брать мазок лучше доверить опытному дерматовенерологу.

Обратиться можно в специализированный диспансер или кабинет частной практики.  дерматовенеролог Ленкин Сергей Геннадьевич Как правило, здесь врачи имеют налаженный доступ к современной лабораторной диагностике. Что касается влияния пациента на результат исследования, то небольшая подготовка все же требуется:

    • Цервикальный мазок на ВПЧ женщинам необходимо сдавать в середине цикла.
    • Мужчинам, при локализации процесса в уретре, желательно не мочиться 2-3 часа до процедуры.
    • Пациентам обоего пола нужно исключить половые связи за 48 часов, если мазок будет гинекологического или урологического профиля.
    • Чтоб взять материал из ануса, рекомендуется накануне принять слабительное и опорожнить кишечник с утра перед визитом к врачу. Если этого не сделать, потребуется очистительная клизма.
    • При локализации кондиломы во рту, с вечера не чистить зубы, утром не завтракать, пока врач не возьмет мазок.

Такие несложные меры значительно повышают вероятность того, что в мазке окажутся искомые клетки с ВПЧ и возбудителей удастся успешно типировать.

Расшифровка и интерпретация мазка на вирус папилломы

Здесь определяющее значение имеет та задача, которая ставилась перед анализами. Если необходимо установить генотип возбудителей, то все просто. В бланке ответа перечисляются все обнаруженные генотипы ВПЧ, на обнаружение которых рассчитана выбранная тест-система.

Интерпретация результатов мазка с концентрацией несколько сложнее. Здесь применяются логарифмические операторы, но все вычисления проводятся автоматически.                                 Врач анализирует уже готовые значения:

    • концентрация ВПЧ менее 3 lg копий на 10 в 5 степени клеток мазка считают клинически малозначимым показателем, существует высокая вероятность самопроизвольного выздоровления;
    • при 3–5 lg копий ДНК на 10 в 5 степени клеток — клинически значимое количество вируса;
    • более 5 lg на 10 в 5 степени – показатель высокой опасности по развитию и прогрессированию злокачественной опухоли.

В тактике лечения обязательно учитываются размеры кондиломы, локализация, внешний вид, сопутствующая патология (ВИЧ, ЗППП) и другие факторы. Поэтому даже если концентрация онкогенных типов ВПЧ будет низкой, врач может рекомендовать удаление кондиломы, инъекции интерферонов. А также вакцинацию от наиболее опасных в плане онкогенности вирусов.

 гардасил - прививка от вируса папилломы Нельзя игнорировать контрольные обследования. Если в отношении кондиломы предпринималось лечение, то необходимо из проблемного места взять два образца с промежутком в 2 недели и 6 месяцев.

С целью более точного результата, врач может рекомендовать исследовать один мазок ПЦР, а другой – с помощью ДАЙДЖИН-теста. Отрицательные результаты обеих проб дают большой процент вероятности того, что лечение прошло успешно.

По истечении полугода ВПЧ могут продолжать обнаруживаться или появляются в ранее отрицательном мазке снова, или возникает визуально определяемая кондилома на том же месте. Значит, имеет место персистенция вирусов, требуется пересмотреть план лечения. А перед тем, как лечить рецидив, нужно взять новые мазки, расширив зону сбора материала на несколько сантиметров.

Если вам необходимо сдать мазок на вирус папилломы, обращайтесь к автору этой статьи – дерматовенерологу в Москве с многолетним опытом работы.