Диагностика ВИЧ: методы исследования, сроки выполнения анализов

Инфекция «вирус иммунодефицита человека» — ВИЧ, представляет собой вирусное заболевание. Оно постепенно разрушает определенные лейкоциты и может вызвать синдром приобретенного иммунодефицита — СПИДа.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) относится к типу ретровирусов.

Что такое ретровирус?

Представляет собой геномный ДНК и хранит генетическую информацию не только как ДНК (большинство других организмов использует только ДНК), но и как РНК (рибонуклеиновая кислота).

На сегодня принято разделять следующие пути инфицирования ВИЧ:

• половой контакт без использования средств защиты
• перинатальный путь заражения (наблюдается у детей)
• в ходе гемотрансфузии (переливания крови)
• при использовании зараженных шприцев (чаще у инъекционных наркозависимых больных)

Когда ВИЧ проникает в клетки человека, он высвобождает рибонуклеиновую кислоту и реплицирует (копирует) ДНК из РНК ВИЧ с помощью фермента, называемого обратной транскриптазой.

Образовавшаяся ДНК включается в ДНК инфицированных клеток. Этот процесс является обратным, так как задействованы человеческие клетки для репликации РНК и ДНК.

Другие вирусы (инфекции) РНК, такие как полиовирус, вирус гриппа, вирус кори, в отличие от ретровируса не производят репликации ДНК после проникновения в клетку. Эти вирусы производят реплики рибонуклеиновой кислоты исходной РНК.

В ВИЧ-инфицированных клетках каждый раз, когда происходит деление клеток, ДНК интегрированного ВИЧ также реплицируется в дополнение к собственной ДНК клетки.

Репликация ДНК ВИЧ находится в одном из следующих состояний:

• Неактивное (скрытое) состояние: вирус существует, но не оказывает пагубного воздействия на организм человека
• Состояние активации: вирус доминирует над функцией инфицированных клеток, он производит большое количество новых репликаций ВИЧ, которые поражают другие клетки организма, провоцируя состояние стойкого приобретенного иммунодефицита

Важным аспектом терапевтического воздействия остается точная и своевременная диагностика заболевания.

Первые лабораторные исследования ВИЧ- патологии проводились более тридцати пяти лет назад.

Современная диагностика включает использование иммунологических, гематологических и молекулярных методов обнаружения вирусного патогена. Используемые тест-системы прошлого столетия имели достаточно ограниченные возможности и определяли ретровирус первого типа.

Их технические возможности не выходили за рамки определения иммуноглобулина G.

По мере развития лабораторной диагностики и усовершенствования методик исследования появилась возможность обнаружения обоих типов вируса. Появление систем тестирования третьего поколения значительно расширило диагностические возможности.

Теперь обнаружение вируса 1-2 типа возможно уже спустя несколько недель после инфицирования. Такая современная диагностика позволяет быстро назначить антиретровирусное лечение.

В десятки раз сокращает риск развития более тяжелой стадии вируса — СПИД. К последним изобретениям можно отнести системы тестирования 4 поколения. Они являющиеся комбинированными методами исследования.

Система используется для обнаружения антител к ВИЧ обоих типов и одновременного выявления антигена р24 (белка стенки эфира нуклеозидов ретровируса). Такие возможности тест-систем 4 поколения сокращают время «серологического окна» минимум на неделю. (Это период наличия в организме ВИЧ еще без появления антител).

Лабораторная диагностика ВИЧ

Проведение лабораторных анализов является основным аспектом диагностирования ВИЧ-заболевания и назначения адекватной терапии. Кроме того, диагностика является мониторингом качества лечения и состояния здоровья пациента.

Регулярное проведение лабораторных анализов дает возможность:

• контролировать течение инфекционного процесса
• корректировать схему терапии
• проводить мониторинг побочных реакций от приема медикаментозных средств

Стандартный анализ на ВИЧ подразумевает исследование крови пациента.

Основной биологический материал — венозная кровь, забор которой проводится утром, до приема пищи. Предварительной, особой подготовки от пациента не требуется.

Основной подготовкой является исключение приема алкоголя за несколько дней. При возможности прекращение приема антибиотиков и противовирусных средств за 5-7 дней до анализа.

Клинико-иммунологическая экспертиза может проводиться в государственной поликлинике. Но в таком случае потребуется направление от врача-терапевта или семейного доктора.

Сегодня все чаще практикуется диагностика ВИЧ, СПИДа и ЗППП в независимых лабораторных центрах, где имеется возможность сдать анализ анонимно.

В ходе диагностики пациенту присваивается особый номер, известный только ему и персоналу учреждения. Однако в данном случае имеется определенный минус.

Результаты тестирования не могут быть переданы в клинику для последующей госпитализации больного. Не предоставляются гинекологу/венерологу/ инфекционисту, не могут быть занесены в реестр инфекционных патологий (ОРУИБ).

Клиника заболевания: как себя проявляет ретровирус

Основной способ передачи ВИЧ-заболевания:

• половой контакт
• от матери к ребенку (трансплацентарно, через родовой путь, грудное молоко)
• в ходе процедуры переливания крови, трансплантации органа
• при введении внутривенных наркотиков нестерильным шприцем

Другими словами, до тех пор, пока нет контакта с кровью или жидкостями организма, вероятность инфицирования ВИЧ в повседневной жизни почти равна нулю.

Количество вируса, содержащегося в секреторной жидкости, такой как слюна или слезы, очень мало. Даже если вирус находится в данных выделениях, то до сих пор не сообщалось о заражении при использовании общей ванны или полотенца.

ВИЧ является достаточно «хрупким» вирусом, который инактивируется, как только он попадает из организма во внешнюю среду. Клинические проявления патологического процесса зависят от стадийности инфекции.

Начальная стадия инфекции (острая фаза)

Первое проявление инфекции наблюдается спустя 2-3 недели после заражения.

В этот период симптомы ВИЧ такие: лихорадка, боль в горле, мышечная боль, сыпь, лимфаденопатия, головная боль, усталость и т. д. Появляются симптомы гриппа или ангины (как правило, моноцитарного типа).

Ранние признаки болезни могут сопровождать пациента от нескольких дней до месяца и более, во многих случаях спонтанно исчезают. Диагностировать заболевание в данный период считается максимально выгодным для больного. Лечение антиретровирусными препаратами на начальном этапе инфекции показывает наиболее положительные результаты.

Важно! Пациентам, имеющим любые инфекции, передающиеся половым путем (сифилис, гонорея, ВПЧ, хламидии и т. д.) в обязательном порядке рекомендуется сдача анализа на ВИЧ. У больных ретровирусом довольно часто выявляют параллельное течение ЗППП.

Бессимптомная фаза

Количество вируса в крови, достигшего пика из-за иммунного ответа (индукция ЦТЛ или продуцирование антител) после заражения, снижается до определенного уровня, спустя 6-8 месяцев, и приобретает фазу бессимптомного течения. Подобная фаза может длиться несколько лет.

После чего сменяется периодами обострения: симптомы гриппа, недомогание, увеличение лимфатических узлов. В этот период пациент как никогда уязвим перед другими инфекционными патологиями: ЗППП, гепатит, герпес, туберкулез.

Стадия начала СПИДа

Без анти-ВИЧ-терапии после заражения, инфекция прогрессирует, а CD4-положительные Т-клетки стремительно снижаются. Когда число лимфоцитов CD4 составляет 200 / мм 3 или менее, оппортунистические инфекционные заболевания, такие как пневмония, туберкулез, развиваются с вероятностью в 90%.

Кроме того, если количество лимфоцитов CD4 ниже 50 / мм 3 — высокий шанс развития цитомегаловирусной инфекции, атипичного микобактериоза (в 93% случаев), первичных лимфом ЦНС, злокачественных образований. У больных отмечается резкое снижение аппетита, потеря массы тела вплоть до анорексии, постоянные нарушение дефекации с преобладанием диареи, слабость и тому подобное.

Этиология, патогенез, эпидемиология: ВИЧ — вирус из семейства РНК-содержащих патогенов, поражает клетки иммунной системы, провоцирует развитие СПИДа, оппортунистических инфекций, онкологию. Согласно статистическим данным, приведенным на 2011 год, в мире зарегистрировано 62 миллиона пациентов с диагнозом ВИЧ.

Пока пациент прибегает к антиретровирусной терапии, можно подавить вирусную нагрузку в значительной мере. Но, к сожалению, полностью ликвидировать вирус из организма невозможно. Поэтому крайне важно как можно быстрее диагностировать заболевание и начать соответствующее лечение.

Методы диагностики ВИЧ

Диагностические мероприятия по выявлению ВИЧ-инфекции включают два этапа:

• выявление факта заражения (наличие в организме ретровируса)
• определение стадии процесса (как давно произошло инфицирование и как сильно поражены клетки иммунной системы)

Результаты диагностики позволят определиться с тактикой терапии и спрогнозировать дальнейшее течение болезни.

Существуют различные серологические методики выявления инфекционных, вирусных и бактериальных патологий. При диагностировании ВИЧ, как правило, применяются следующие серологические анализы.

ИФА (иммуноферментный анализ)

Является наиболее часто назначаемым анализом при необходимости подтвердить/опровергнуть наличие в организме ретровируса.

Анализ основан на определение антител к вирусу, которые образуются в ходе попадания патогена в организм человека. Информативность диагностического метода достигает 96%.

Однако, если исследование проводится на этапе еще отсутствия антител, можно получить ложноположительный результат. В таком случае назначается повторное исследование ИФА через 2-3 месяца. Но гораздо целесообразней проведение ПЦР-анализа, способного выявить заражение на самых ранних сроках.

Также получить ложноположительный результат можно при наличии у пациента:

• патологий аутоиммунного характера
• инфекций, протекающих в хронической форме
• заболеваний онкологического типа

В другом случае, данный результат может быть получен при наличии ранних сроков беременности.

Иммунный блотинг (Western Blot)

Специфика анализа направлена на выявление белков ВИЧ-инфекции.

Как правило, диагностика проводится в качестве подтверждающего теста. При положительном результате дает возможность поставить окончательный диагноз «вирус иммунодефицита человека».

Стандартно иммуноблоттинг выдает три варианта результата: положительно, отрицательно, сомнительно. В первых двух случаях расшифровка проста — ВИЧ отсутствует/присутствует.

Сомнительный вариант, как правило, означает присутствие в организме ВИЧ. Но с инфицированием не более трех месяцев назад, когда организм не успел выработать весь спектр антител.

Также, получение сомнительного результата свойственно для пациентов с туберкулезом, злокачественными патологиями, прошедших многократные манипуляции по переливанию крови.

ПЦР (полимеразная реакция)

Суть метода заключается в определении ДНК вируса и его РНК. Является наиболее информативным и точным методом обнаружения патогена.

Может обнаружить ВИЧ на ранних сроках инфицирования, еще до образования антител к ретровирусу. Чувствительность ПЦР составляет 99%, получить ложный результат практически невозможно.

Полимеразная реакция назначается пациенту с целью:

• указать присутствие или отсутствие вируса ВИЧ в организме человека при сомнительных результатах, полученных в ходе других лабораторных тестов
• идентификации типа ретровируса (ВИЧ-1, ВИЧ-2), а также для установления нагрузки на организм, спровоцированной вирусом
• установления статуса рожденного ребенка от матери, имеющей заболевание
• выявления патогена в крови, которая в дальнейшем будет использована для переливания

ПЦР является наиболее точным анализом, способным выявить ретровирус спустя 7-10 дней после попадания в организм. При этом точность результата на данном сроке будет составлять 98-99%.

Однако, ПЦР имеет некоторые особенности, по этой причине может назначаться несколько раз. В связи с высокой чувствительностью анализ способен реагировать не только на ретровирус. Но и на самые незначительные инфекционные процессы, происходящие в организме. Поэтому окончательный диагноз после одноразового проведения полимеразной реакции не ставится.

Следующая особенность ПЦР — необходимость современной и дорогостоящей аппаратуры. Поэтому анализ не проводится в государственных клиниках. Осуществляется тестирование в современных лабораториях, где стоимость анализа может стартовать от 1000 рублей.

Экспресс-тестирование

Назначается в экстренных ситуациях, когда срочно требуется проведение оперативного вмешательства.

Биологическим материалом для исследования является моча. Экспресс-тест, по мнению некоторых специалистов, имеет точность до 96%, но, тем не менее, является дополнительным тестированием. На основании полученных результатов данного исследования, диагноз не ставится.

В обязательном случае проводится ИФА или ПЦР.

Сроки и цена диагностики ВИЧ

Через какое время можно получить готовый анализ?

Ответ лабораторного центра о результатах анализа можно получить спустя несколько дней, в зависимости от загруженности учреждения.

Также во многих центра имеется дополнительного услуга «срочное тестирование», что позволяет получить результат спустя несколько часов.

Относительно ценовой политики, то стоимость будет зависеть от выбранной лаборатории и методики исследования. Так, стоимость может стартовать от 500 рублей и достигать 10 000-15 000.

Цена Western Blot стартует от 2500 рублей и может достигать 3000-4000. Получить готовый результат можно спустя 2-5 дней.

Если проводится ПЦР в реальном времени с определением обоих типов ретровируса, а также их РНК и ДНК, стоимость может достигать 5000 рублей и выше. Длительность диагностирования от 5 до 10 дней.

Согласно действующему закону РФ, иммунологические исследования, проводимые в государственных учреждениях, предоставляются на бесплатной основе. Анализ на ВИЧ в обязательном порядке назначается пациенткам в период беременности, больным в предоперационный период, донорам органов или части ткани.